瀏覽數(shù)量： 0 作者： 本站編輯 發(fā)布時間： 2024-05-15 來源： 本站
在細胞實驗中，細胞不貼壁是一個常見且令人困擾的問題，它往往會給實驗帶來諸多不便，影響實驗進行和結(jié)果的準(zhǔn)確性。當(dāng)遇到細胞不貼壁的情況時，我們可以從以下幾個方面入手，排查不貼壁的原因并找尋相對應(yīng)的解決方案。
01 細胞不貼壁的原因及解決方法
胰蛋白酶消化過度
微生物污染
支原體感染或其他微生物污染會導(dǎo)致細胞功能紊亂，影響貼壁能力；
解決方法：分離培養(yǎng)物，檢測支原體。如果發(fā)現(xiàn)支原體污染，應(yīng)丟棄培養(yǎng)物。
培養(yǎng)基pH值過堿
培養(yǎng)基pH值過高，可能導(dǎo)致細胞不適應(yīng)，影響貼壁；
解決方法：使用無菌醋酸溶液，調(diào)整pH值或充入無菌CO?以維持適宜的pH環(huán)境。
細胞老化
細胞傳代次數(shù)過多，可能會導(dǎo)致細胞老化，失去貼附性;
解決方法：復(fù)蘇新的細胞，使用20%血清幫助細胞復(fù)原并注意傳代接種的細胞密度和時機。
接種細胞起始濃度不當(dāng)
細胞接種量過低或過高，可能無法形成有效的細胞外基質(zhì)，影響貼壁；
解決方法：改變培養(yǎng)液成分，使用含有促貼壁因子的培養(yǎng)基。
02 如何判斷細胞是否受污染
看培養(yǎng)基的濁度和顏色變化
細菌和真菌污染通常會導(dǎo)致培養(yǎng)基迅速變渾濁，顏色也會發(fā)生變化。
鏡下觀察
用細胞間配置的顯微鏡可以觀察到細菌和真菌的結(jié)構(gòu)，有助于早期發(fā)現(xiàn)微生物污染。
培養(yǎng)基中的異味
某些微生物污染會產(chǎn)生易察覺的特殊氣味，這可以幫助檢測污染。
03 注意事項
在細胞培養(yǎng)過程中，必須嚴格遵循無菌操作技術(shù)，以防細胞遭受污染。要使用新鮮且質(zhì)量達標(biāo)的培養(yǎng)基及細胞株，以此來降低污染出現(xiàn)的可能性。還需要定期對細胞狀態(tài)進行檢查，如有需要，應(yīng)及時對細胞進行傳代或處理異常細胞。
